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塑料培養皿全解析:細胞培養實驗中的選擇、操作與注意事項?
以下是塑料培養皿的正確使用方法指南,綜合實驗室操作規范與注意事項:
一、使用前準備?
規格選擇?
35mm?:適合小規模實驗(如干細胞克隆),培養基用量2-3ml。
60mm?:通用型,培養基4-5ml,適用于常規細胞傳代。
100mm/150mm?:需大量擴增細胞時使用,培養基8-10ml,注意開口大易污染。
拆封與檢查?
一次性塑料培養皿通常預滅菌(γ射線或EO),拆封前確認包裝完好。
檢查表面是否平整無裂紋,避免影響細胞貼附。
二、操作步驟?
無菌操作?
超凈臺內酒精擦拭臺面及手套,避免手部接觸皿內壁。
開蓋時短暫灼燒皿口(若使用酒精燈),減少空氣污染。
培養基與細胞接種?
貼壁細胞:接種密度建議5×10?~1×10? cells/cm2,搖勻時采用“十字法"混勻。
懸浮細胞:選擇低吸附處理培養皿,減少細胞損失。
培養環境控制?
CO?培養箱中倒置皿蓋,防止冷凝水滴落干擾細胞生長。
保持水平放置,避免培養基分布不均。
三、使用后處理?
廢棄規范?
接觸生物樣本的培養皿需按生物廢物處理,不可隨意丟棄。
未污染的塑料皿可高溫高壓滅菌(需確認材質耐溫性)后丟棄。
重復使用(僅限可滅菌型)?
耐高溫PP材質可121℃高壓滅菌15分鐘。
普通PS材質建議化學消毒(如75%酒精浸泡30分鐘)。
四、常見問題解決?
細胞貼附差?:檢查是否誤用未TC處理的培養皿,或包被步驟失效。
邊緣干涸?:培養箱濕度不足時,可在周圍放置無菌水盤。
污染跡象?:立即終止實驗,并對操作環境消毒。
五、注意事項?
避免高溫變形?:PS材質培養皿不可高壓滅菌或高溫烘干。
觀察記錄?:選擇高透明度培養皿,便于直接顯微鏡觀察。
分裝保存?:未使用的皿條需密封防潮,避免長時間暴露。
如需特定滅菌參數或細胞類型適配建議,請參考產品說明書。
注:以上資料僅供參考,如需特定品牌或滅菌參數,請參考產品說明書或是咨詢供應品牌商。
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